एक स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री कैसे करें

स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री एक प्रयोगात्मक तकनीक है जो किसी विशेष समाधान में विलायक की एकाग्रता को मापने के लिए उपयोग की जाती है, जो उसके द्वारा अवशोषित प्रकाश की मात्रा की गणना करता है। यह तकनीक शक्तिशाली है क्योंकि कुछ यौगिकों को विभिन्न तीव्रता के साथ प्रकाश के विभिन्न तरंग दैर्ध्य को अवशोषित कर लेगा। समाधान से गुजरने वाले प्रकाश का विश्लेषण करते हुए, आप उस समाधान में भंग ठोस पदार्थों की पहचान कर सकते हैं और इन पदार्थों की एकाग्रता क्या है स्पेक्ट्रोफोटोमीटर एक अनुसंधान प्रयोगशाला में समाधानों का विश्लेषण करने के लिए उपयोग किया जाने वाला उपकरण है।

चरणों

Video: स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री परिचय | काइनेटिक्स | रसायन विज्ञान | खान अकादमी

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क्यूवेट्स या टेस्ट ट्यूबों को साफ करें यदि आप स्कूल के लिए प्रयोगशाला अभ्यास कर रहे हैं, तो आप डिस्पोजेबल टेस्ट ट्यूब का उपयोग कर सकते हैं जिन्हें साफ करने की आवश्यकता नहीं है। यदि आप पुन: प्रयोज्य cuvettes या टेस्ट ट्यूबों का उपयोग कर रहे हैं, तो सुनिश्चित करें कि प्रत्येक उपयोग के पहले वे पूरी तरह साफ कर दिए गए हैं। विआयनीकृत पानी के साथ ध्यान से प्रत्येक क्युवेट को कुल्ला।

Video: एक स्पेक्ट्रोफोटोमीटर कैसे काम करता है?

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बाल्टी में उचित मात्रा में नमूना डालें। कुछ क्यूवेट्स में अधिकतम 1 मिलिलीटर (एमएल) है, जबकि टेस्ट ट्यूब में अधिकतम 5 एमएल का हो सकता है। जबकि लेज़र जो प्रकाश का उत्पादन करता है वह तरल के माध्यम से जा रहा है और कंटेनर का एक खाली हिस्सा नहीं है, आपको एक कठोर पठन मिल जाएगा।

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नियंत्रण समाधान तैयार करें नियंत्रण समाधान में केवल रासायनिक विलायक होता है जिसमें विलेपन का विश्लेषण किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, यदि आपके पास पानी में नमक भंग होता है, तो नियंत्रण समाधान पानी ही होगा। यदि आपने पानी लाल रंगा है, तो नियंत्रण भी लाल होना चाहिए। इसका विश्लेषण करने के लिए उसी प्रकार के कंटेनर में एक ही वॉल्यूम होना चाहिए और उसका विश्लेषण किया जाना चाहिए।

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बाल्टी के बाहर साफ करें स्पेक्ट्रोफोटोमीटर में क्युवेट को रखने से पहले, सुनिश्चित करें कि धूल कण या गंदगी से हस्तक्षेप से बचने के लिए संभव के रूप में साफ है। एंटी-लिंट उपचार के साथ ऊतक के कपड़े का प्रयोग करना, तरल या धूल के किसी भी शेष बूंदों को हटा दें जो क्युवेट के बाहर हो सकते हैं।

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नमूना समाधान का उपयोग करके डिवाइस को कैलिब्रेट करें नमूना डिब्बे में नमूना समाधान रखें और ढक्कन को बंद करें। एनालॉग स्पेक्ट्रोफोटोमीटर में, प्रकाश की पहचान की तीव्रता के अनुसार चलता है कि एक सुई के साथ एक स्क्रीन होगी। जब नमूना अंदर है, तो आपको यह देखना चाहिए कि सुई सही स्थानांतरित होती है उस मान को रिकॉर्ड करें, अगर आपको इसे बाद में चाहिए मशीन में अभी भी नियंत्रण समाधान के साथ, समायोजन घुंडी का उपयोग करके सुई को समायोजित करें।

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नियंत्रण समाधान निकालें और अंशांकन जांचें नमूना हटा दिए जाने के बाद, सुई शून्य पर रहनी चाहिए या डिजिटल रीडिंग शून्य रहनी चाहिए। डिवाइस पर नियंत्रण समाधान लौटाएं और सुनिश्चित करें कि सुई या पढ़ने में कोई बदलाव नहीं है। यदि डिवाइस को नियंत्रण समाधान से अच्छी तरह से कैलिब्रेट किया गया है, तो सब कुछ शून्य पर रहना चाहिए।

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अपने नमूने के अवशोषण को मापें नियंत्रण समाधान निकालें और तंत्र में प्रयोग के नमूने को रखें। जब तक सुई स्थिर न हो जाए या जब तक डिजिटल नंबर बदलना बंद न हो जाए तब तक लगभग 10 सेकंड तक प्रतीक्षा करें % ट्रांसमिशन या शोषक मूल्यों को पंजीकृत करता है

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प्रकाश के विभिन्न तरंग दैर्ध्य के साथ नमूना दोहराएं। नमूने में कई अज्ञात यौगिक हो सकते हैं, जिनके शोषक तरंग दैर्ध्य के अनुसार भिन्न होंगे। अनिश्चितताओं को खत्म करने के लिए स्पेक्ट्रम भर में 25 एनएम के अंतराल पर रीडिंग दोहराएं। यह आपको अन्य रासायनिक घटकों का पता लगाने की अनुमति देगा जिन पर आपको संदेह है कि वे मौजूद हैं।

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एक ग्राफ में तरंग दैर्ध्य मूल्य बनाम अवशोषण मूल्य दर्शाता है। अवशोषण मूल्य लम्बवत अक्ष पर और प्रकाश की तरंग दैर्ध्य पर क्षैतिज अक्ष एक्स एक विशेष प्रयोग के लिए दिए गए विपरीत प्रस्तुत किया है। प्रकाश नमूना के प्रत्येक तरंग दैर्ध्य के लिए अधिकतम अवशोषण के मान प्लॉट नमूने के अवशोषण स्पेक्ट्रा का परीक्षण किया और यौगिक होते हैं जो नमूना पदार्थ और उनके अनुपात को बनाने को पहचानती है।

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विशिष्ट तत्वों के लिए ज्ञात फ़्रेमों के साथ शोषक स्पेक्ट्रम की साजिश की तुलना करें। प्रत्येक यौगिक में अवशोषण का एक अनूठा स्पेक्ट्रम होता है और हर बार जब यह मापा जाता है, तब वही तरंगदैर्ध्य पर हमेशा चोटी पैदा करेगा। ज्ञात संयुग्मों के साथ अज्ञात तत्वों के ग्राफ़ की तुलना करके, आप समाधान में विलेय को पहचान सकते हैं।